
一、仪器介绍
微量热泳动(Microscale Thermophoresis, MST)是指分子在微观的温度梯度场中的定向运动。生物分子结构/构象变化会引起其水化层、分子量、电荷的变化,而这种变化会导致分子在温度梯度场中的分布的改变,这种改变可以用来分析分子间的相互作用以及各种化学计量学参数。MST 可以直接在接近天然的环境(血清和细胞裂解液)、任意生物溶液中溶液中(无DMSO等有机溶剂浓度的限制)测量分子间相互作用,而不需要一个固定的表面,每次实验只需要4-6ul的样品量,使用低费用的毛细吸管来完成实验,能够在短短10分钟之内测量16个样品的数据,这些特点使得其成为一种新的、方便、快速、高通量的分子间相互作用的分析仪器。而且,该技术其灵敏,甚至可以检测到像蛋白质磷酸化或离子结合到蛋白质和DNA/RNA的微小的变化。
通过毛细吸管中心的红外激发和外围的冷却,毛细吸管中产生地微观区域的温度梯度差异,将所需要测量的溶液(缓冲液、血清、细胞裂解液和其它生物液体)填充到毛细吸管之中,然后通过监测分子的荧光信号的分布进而监测分子在温度梯度场中的分布。这个荧光信号可以使分子自发的荧光(如蛋白中的色氨酸);或者标记荧光染料到蛋白上;或者使用融合表达蛋白(如GFP融合蛋白)。任何一、二、三和/或四结构的变化所导致的水化层的改变都会影响分子的热泳动效应,可以准确而灵敏测量分子间的相互作用以及分子结构的变化,即使是非常微小的构象变化也可以检测到,所以,其灵敏度也是其他传统技术无法比拟的。



二、仪器型号
Monolith RED/Label Free
三、适用范围
主要应用于基于靶标的药物筛选、植物信号通路、神经退行性疾病、肿瘤抑制剂开发、中药活性成分、蛋白泛素化、竞争性结合实验、酶与底物的结合、农药残留和癌症标志物的研究等。
四、样品互作类型
蛋白-蛋白、蛋白-小分子、蛋白-离子、抗原-抗体、蛋白-多肽、蛋白-脂类、蛋白-核酸、病毒颗粒、纳米颗粒、核酸适配体和细胞裂解液/血清等。
五、设备特点
1. 检测速度快:10分钟获得亲和力数据
2. 灵敏度高:测定从离子到复合物间相互作用(40Da-2.5MDa)
3. 样品使用量低:nM浓度下只需4ul样品量
3. 溶液中测量:不需要固定到固相表面,保证样品天然构象
4. 检测不受限制:可以在血清和裂解液中测量而不需纯化
5. 亲和力范围广:可测定pM-mM范围的解离常数
6. 运行成本低:耗材价格低、无维护费、非常简单易操作
咨询电话 :赵老师 88381719
地点:趵突泉校区综合楼101